시험안내

시험안내유전독성시험

유전독성시험 (Genetic Toxicology)

유전독성이란 세포유전물질(DNA)에 상해성을 나타내는 성질(Genotoxicity)을 포함하는 광범위한 의미로 사용되고 있으며, 유전자 돌연변이, 염색체이상, DNA에 대한 상해성 또는 수복성 등 지표에 따라 시험법이 구분되어 수행됩니다.

또한, 유전독성 시험은 신약, 화학물질 등의 초기 스크리닝 단계에서 향후 시험을 진행하는데 필수적인 검토자료가 된다.

시험분야

박테리아를 이용한 복귀돌연변이시험 (Bacterial Reverse mutation Test)
In Vitro 염색체이상시험 (In Vitro Mammalian Chromosomal Aberration Test)
In Vivo 염색체이상시험 (Mammalian Bone Marrow Chromosomal Aberration Test)
In Vitro 소핵시험 (In Vitro Mammalian Cell Micronucleus Test)
In Vivo 소핵시험 (Mammalian Erythrocyte Micronucleus Test)
In Vivo 코멧시험 (In Vivo Mammalian Alkaline Comet Assay)
포유류 정원세포를 이용한 염색체이상시험 (Mammalian Spermatogonial Chromosomal Aberration Test)
Hprt 및 xprt 유전자를 이용한 In Vitro 포유류세포 유전자 돌연변이 시험(In Vitro Mammalian Cell Gene Mutation Tests using the Hprt and xprt genes)
Thymidine Kinase 유전자를 이용한 In Vitro 포유류세포 유전자 돌연변이 시험(In Vitro Mammalian Cell Gene Mutation Tests Using the Thymidine Kinase Gene)

시험방법

원칙적으로 모든 시험물질에 대하여 아래 표준조합 중 1 가지를 선택하여 각 호의 유전독성시험을 실시하여야 한다. 다만, 시험물질의 특성 및 시험의 실시목적 등을 고려하여 필요하다고 인정되는 경우에는 OECD 유전독성시험기준에서 정한 그 밖의 유전독성시험으로 대체하거나 추가적으로 실시할 수 있다.

표준조합 1
1) 박테리아를 이용한 복귀돌연변이시험
2) 포유류 배양세포를 이용한 다음 어느 하나의 시험
  • 체외 염색체이상시험
  • 체외 소핵시험
  • 체외 마우스 림포마 TK 시험
3) 설치류 조혈세포를 이용한 다음 어느 하나의 시험
  • 체내 소핵시험
  • 체내 염색체이상시험
표준조합 2
1) 박테리아를 이용한 복귀돌연변이 시험
2) 설치류 조혈세포를 이용한 체내 소핵시험
3) 체내 코멧시험

박테리아를 이용한 복귀돌연변이 시험
Bacterial Reverse mutation Test, OECD TG 471

복귀돌연변이 시험은 히스티딘 생합성 효소계를 조절하는 DNA상의 다른 위치에 Base-pair substitution type으로 변형된 균주 (TA100, TA1535, WP2uvrA, WP2uvrA (pkM101), TA102 등) 와 frame-shift type으로 변형된 균주 (TA98, TA1537, TA1538, TA97a 등)를 이용하여 각각 히스티딘 및 트립토판 요구성 균주로 되돌아가는 복귀변이원을 검색하는 방법이다. 신속하고 간단한 방법으로써 유전독성의 가장 기본적인 평가방법이다.

In Vitro 염색체이상시험
In Vitro Mammalian Chromosomal Aberration Test, OECD TG 473

배양된 포유동물 세포 내에 염색체의 구조적 이상을 유발하는 물질을 확인하는 시험으로 구조적이상은 염색체 이상 또는 염색분체 이상으로 크게 나누어진다. 또한, 배수성의 증가는 수적이상을 유도하는 잠재성을 화학물질이 갖고 있다는 것을 제시할 수 있다. 일반적으로 CHL(Chinese Hamster Lung) 및 CHO(Chinese Hamster Ovary) 세포를 이용하여 시험을 수행하며 TK6 (human lymphoblastoid cell line), V79 (Chinese Hamster lung) 세포도 수행할 수 있다. 포유류 돌연변이원과 발암원의 가능성을 검사하는 데 사용된다.

In Vivo 소핵시험
Mammalian Erythrocyte Micronucleus Test, OECD TG 474

설치류를 이용한 In vivo 소핵시험은 골수 또는 말초혈액세포에서 채취되는 적혈구의 분석을 통해 시험물질에 의해 유발되는 적아세포의 염색체 혹은 유사 분열기관에 대한 손상을 검출하는 시험법으로 체내의 물질대사, 약물동태 등을 고려하여 검색할 수 있는 시험법이다. 일반적으로 마우스 또는 랫드를 이용하여 시험을 수행한다.

Thymidine Kinase 유전자를 이용한 In Vitro 포유류세포 유전자 돌연변이 시험
In Vitro Mammalian Cell Gene Mutation Tests Using the Thymidine Kinase Gene, OECD TG 490

체외 포유동물 세포 유전자 돌연변이 시험법으로 화학물질 등에 의한 유전자 돌연변이를 검출하는데 이용된다. 세포주는 마우스 림포마 (L5178Y Tk⁺/⁻-3.7.2C) 및 TK6 (human lymphoblastoid cell line) 세포를 사용하며 thymidine kinase(TK)의 돌연변이를 검색하기 위한 시험으로 유전자 돌연변이 및 염색체이상을 검출 할 수 있다.

In Vivo 코멧시험
In Vivo Mammalian Alkaline Comet Assay, OECD TG 489

포유류 동물 종을 이용하여 시험물질 투여 후 동물로 부터 분리한 세포 (간, 위, 골수 및 고환 등) 또는 핵에 함유된 DNA의 절단 여부를 평가하여 시험물질에 의한 DNA 손상을 확인하여 유전독성을 확인 할 수 있다.

In Vitro 소핵시험
In Vitro Mammalian Cell Micronucleus Test, OECD TG 487

체외 소핵 시험은 세포분열 단계 중 간기 세포의 세포질에서 소핵 유무를 확인하기 위한 시험법이며, 이 분석법은 시험물질 처리 동안 또는 처리 후에 세포분열에 들어간 세포에서 염색체이상 유발물질 또는 이수체 유발원으로 작용하는 화학물질을 선별할 수 있다.

In Vivo 염색체이상시험
Mammalian Bone Marrow Chromosomal Aberration Test, OECD TG 475

포유동물 생체내 염색체 이상 테스트는 일반적으로 설치류의 골수 세포에서 테스트 화합물에 의해 유도된 구조적 염색체 이상을 검출할 수 있는 시험법이다.

Hprt 및 xprt 유전자를 이용한 In Vitro 포유류세포 유전자 돌연변이 시험
In Vitro Mammalian Cell Gene Mutation Tests using the Hprt and xprt genes, OECD TG 476

포유류세포 (CHO, CHL, V79, L5178Y 및 TK6 등)의 유전자 (Hypoxanthine-guanine phosphoribosyl transferase gene(Hprt) 및 xanthine-guanine phosphoribosyl transferase transgene(Xprt))에 이상을 유발하는 물질을 검출하는 시험법이다.

포유류 정원세포를 이용한 염색체이상시험
Mammalian Spermatogonial Chromosomal Aberration Test, OECD TG 483

이 시험은 포유류의 분열하는 정원세포 내 구조적 이상(염색체형 이상 또는 염색분체형 이상)을 유발하는 물질을 확인하는 시험법이며, 염색체 숫자의 변화는 측정하지 않는다.

In Vivo 체내 노출 관련 시험

생체내(in vivo) 유전독성시험에서 음성의 결과가 나온 경우, 사용된 시험종에서의 전신적 노출을 증명하거나 지표 조직에서의 노출의 특성을 확인하는 것이 바람직하다.